Хранение спермы
Такой метод хранения спермы (эякулята), как криоконсервация, получил довольно широкое распространение в криомедицине. Он включает в себя добавление к семенной жидкости специальной среды, и дальнейшее замораживание ее с применением паров жидкого азота. Рассмотрим данный метод сохранения мужских половых клеток более подробно и расскажем о том, какая сперма пригодна для разбавления и дальнейшего хранения.
При естественном оплодотворении секрет мужских половых желез смешивается частично с клетками эпидермиса, в результате происходит некоторое изменение рН среды, что приводит к разрушению липопротеидного покрова спермиев, т.е. к их активации. Будучи в таком состоянии, продолжительность жизни половых клеток резко ограничена, что исключает дальнейшее их использование для ЭКО. Именно поэтому и используют метод криоконсервации.
Данная методика значительно повышает срок хранения спермы, и позволяет:
- уменьшить двигательную активность спермиев;
- обеспечивает их дополнительным источником энергии;
- защищает мембраны половых клеток от разрушения;
- предотвращает накопление токсических продуктов метаболизма;
- блокирует размножение находящихся в эякуляте микроорганизмов.
Какие среды используют для хранения спермы?
Для того чтобы облегчить, так называемый процесс дробления эякулята, необходимый для выделения из него половых клеток, проводят предварительное разведение спермы. При этом используют специальные реагенты.
На сегодняшний день принято использовать синтетические среды для хранения спермы, каждая из которых требует особых условий. Как правило, такого рода среда состоит из нескольких компонентов, обычно их не менее трех. Так, в их составе можно выделить сахара, наиболее часто и используются глюкоза и лактоза, цитрат натрия.
Если говорить о конкретных химических соединениях, которые могут быть использованы в качестве сред для хранения спермы, то среди таких можно назвать Трис-буфер, Трилон Б, ЭДТА, Спермосан ППК.
При каких условиях хранят эякулят?Технология замораживания и хранения спермы предполагает соблюдение особого режима охлаждения, а также использование специальных аппаратов. При этом само лабораторное помещение должно быть в обязательном порядке оборудовано приборами, осуществляющими стерилизацию воздуха.
Перед тем как будет проводиться забор эякулята, все необходимые приборы для криоконсервации, в частности всевозможные колбы, мерные цилиндры, пипетки, бумажные фильтры стерилизуют в специальном шкафу, при температуре 130-150 градусов. Перед непосредственной процедурой забора их помещают в специальный термостат, поддерживающий постоянную температуру – 37 градусов.
После того как образец спермы мужчины забран, его помещают в стерильную колбу. Температура хранения спермы должна быть постоянной. При этом процесс охлаждения проводят в 2 этапа.
На первом из них эякулят сначала помещают в холодильную камеру, в которой постепенно понижают температуру. Как правило, ее значение составляет -35 градусов. После этого проводят глубокую заморозку, погружая специальную колбу со спермой в жидкий азот. В таком состоянии срок хранения спермы может достигать нескольких десятилетий.
Для использования эякулята, криоконсервированного ранее, сосуд вместе с ним помещают в теплую воду, где происходит медленное оттаивание. После этого удаляют использованные криопротекторы, путем многократного переосаждения спермы на центрифуге. После этого саму семенную жидкость заменяют на питательную среду, в которую и помещают в последствии сперматозоиды.
© Orphus